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PA317 小鼠成纤维细胞

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PA317细胞说明书

Cat No.: FY110018

本产品仅供科研使用。

细胞名称:

PA317

细胞形态图:


细胞来源:

小鼠,胚胎,小鼠成纤维细胞。

细胞简介:

PA317细胞株源自TK- NIH/3T3细胞,通过pBR322中的包装结构DNA(pPAM3)pBR322中的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因共同转染构建而成。   通过感染或转染将逆转录病毒载体导入这些细胞,结果生成可以感染许多哺乳动物细胞的双嗜性载体颗粒。   这株细胞生成的病毒颗粒已成功地用于将基因导入人类。 可能因为用于构建这株细胞而转入的DNA丢失,能够包装逆转录病毒载体的PA317细胞百分比随传代而减少。 在包含0.03 mM 次黄嘌呤, 0.001 mM 氨甲喋呤和0.02 mM 胸苷的培养基中短暂(大约5)选择,可以选出保留了包装功能的细胞。   选择后,细胞应在HT培养基(0.03 mM 次黄嘌呤,0.02 mM 胸苷)中培养4天,以稀释残留的氨甲喋呤。成纤维细胞,贴壁生长。

培养基:

DMEM 90%Fetal Bovine Serum 10%

培养条件:

37 5% CO2

消化条件:

1000 rpm 离心5 min0.25% (w/v) Trypsin-0.53 mM EDTA溶液,37消化1-3 min

传化比例:

13-15

换液时间:

2-3天换液一次

冻存液比例:

85%培养基,10%FBS, 5% (v/v) DMSO

冻存密度:

1-3 ×10E6/管,液氮保存

 


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