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微量样本DNA提取试剂盒(磁珠法) (仅用于科学研究) 产品编号: FYG-6001-100T FYG-6001-500T 存储条件: 室温避光保存;有效期1年。 产品组分:
产品简介: 本试剂盒采用独特配方的裂解缓冲液释放样本中的DNA,并使DNA与高吸附作用的磁珠结合,能从微量样本中分离纯化得到高质量的DNA样本。裂解缓冲液结合蛋白酶K可对动物来源的细胞进行裂解和消化,将DNA充分释放;DNA吸附磁珠对核酸具有很强的亲和力,能快速吸附DNA,通过洗涤等步骤快速纯化。整个过程便捷、有效、安全,DNA得率高,质量稳定,适合PCR、qPCR、文库构建等多种后续实验。 适用样本:血液、细胞、唾液、口试子 适用研究:SNP检测、PCR鉴定、qPCR检测等 自备耗材和设备: 磁力架(适配1.5 ml、2 ml离心管); 异丙醇; 无水乙醇。 操作过程: 1. 实验准备: 首次使用时,须向漂洗液C中加入无水乙醇,无水乙醇占比70%。加入乙醇后在相应位置进行标注。 DNA吸附磁珠使用前充分混匀。 观察各溶液状态,若溶液中产生沉淀,可37℃水浴10分钟进行沉淀的溶解。 2. 样本处理: 2.1. 血液样本:取200 μl全血,加入200μl裂解液和10μl蛋白酶K,充分混匀,65 ℃孵育10分钟。 2.2. 细胞样本:取106个细胞的细胞悬液,10000 rpm离心2分钟,弃上清。加入400 μl裂解液和10 μl蛋白酶K,充分混匀,65 ℃孵育10分钟。 2.3. 唾液:取200 μl唾液,加入200 μl裂解液和10 μl蛋白酶K,充分混匀,65 ℃孵育10分钟。 2.4. 口试子:向口拭子中加入500 μl裂解液和10 μl蛋白酶K,充分混匀,65 ℃孵育10分钟。12000 rpm离心2分钟,吸取400 μl水相备用。 3. DNA提取: 3.1. 磁珠孵育:向处理后的样本中,加入280 μl异丙醇,随后加入10 μl已经充分混匀的DNA吸附磁珠;关闭盖子,涡旋混匀,室温孵育5分钟,期间上下颠倒混匀10秒钟,使磁珠和核酸充分结合。孵育结束后瞬时离心。 3.2. 弃液:将离心管置于磁力架上静置1分钟,待溶液彻底澄清后,用移液器小心去除液体。 3.3. 蛋白漂洗:加入500 μl蛋白漂洗液,关闭盖子,将离心管从磁力架上取下,上下颠倒混匀30秒钟,使磁珠充分悬浮。瞬时离心。 3.4. 弃液:将离心管置于磁力架上静置1分钟,待溶液彻底澄清后,用移液器小心去除液体。 3.5. 漂洗:加入500 μl漂洗液,关闭盖子,将离心管从磁力架上取下,上下颠倒混匀30秒钟。瞬时离心。将离心管置于磁力架上静置1分钟,待溶液彻底澄清后,用移液器小心去除液体。 3.6. 重复步骤(3.5漂洗)1次。 3.7. 晾干:用10 μl移液器吸取残留的漂洗液,室温晾干3分钟。 3.8. DNA洗脱:将离心管从磁力架上取下。加入60 - 100 μl DNA洗脱液,用移液器吹打使磁珠重新悬浮。瞬时离心。65 ℃孵育5分钟,期间轻轻晃动一次使DNA充分洗脱。 3.9. DNA收取:将离心管放置于磁力架上静置2分钟,待溶液彻底澄清后,小心将液体转移至新的离心管中,该液体即获取的DNA溶液。将DNA溶液置于适当条件保存,或直接用于后续实验。
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