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弗元生物-再生医学培养基 >> 资 料 >>产品引用 >>2022年 >> 刘涛.白藜芦醇对小鼠胚胎腭突间充质细胞生长的影响
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刘涛.白藜芦醇对小鼠胚胎腭突间充质细胞生长的影响

刘涛,任涛涛,刘媛,高婷婷,李健.白藜芦醇对小鼠胚胎腭突间充质细胞生长的影响[J].中国临床药理学杂志,2022,38(06):537-541.DOI:10.13699/j.cnki.1001-6821.2022.06.013.


白藜芦醇对小鼠胚胎腭突间充质细胞生长的影响

刘涛1任涛涛1刘媛2高婷婷1李健3

1. 青岛中医医院口腔外科2. 青岛中医医院神经外科3. 武汉大学口腔医院颌面外科

摘要:目的 研究白藜芦醇调控亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因影响小鼠胚胎腭突间充质细胞生长的内在机制。方法 将20只孕鼠使用维甲酸建立腭裂小鼠的模型;于妊娠13天上午处死孕鼠,解剖仔鼠取体内胎鼠腭突,分离培养腭突间充质细胞,将分离得到细胞随机分为对照组、白藜芦醇组、白藜芦醇+si-NC组、白藜芦醇+si-MTHFR组和白藜芦醇+转化生长因子-β1(TGF-β1)组。对照组细胞用正常培养基进行培养;白藜芦醇组细胞加入100μmol·L-1白藜芦醇进行培养;白藜芦醇+si-NC组和白藜芦醇+si-MTHFR组分别使用control siRNA、MTHFR siRNA与脂质体转染试剂盒进行转染,转染24~48 h,然后用100μmol·L-1的白藜芦醇进行培养;白藜芦醇+TGF-β1组将重组质粒pcDNA3.1-TGF-β1转入胚胎腭突间充质细胞中,转染48 h,然后用100μmol·L-1的白藜芦醇对细胞进行培养。以CCK-8法分别检测0,20,60,100μmol·L-1白藜芦醇对MEPM细胞增殖的影响;以流式细胞仪检测各组细胞周期;以蛋白质印迹法检测各组细胞中MTHF的表达及TGF-β1/SMAD3通路相关蛋白表达。结果 CCK-8结果发现白藜芦醇可显著促进胚胎腭突间充质细胞增殖,100μmol·L-1浓度的白藜芦醇组0,24,48,72 h的光密度分别为0.22±0.01,0.37±0.02,0.60±0.04,1.06±0.09。白藜芦醇+si-NC组和白藜芦醇+si-MTHFR组在72 h的光密度分别为1.06±0.06,0.66±0.05,可通过MTHFR增加MEPM细胞增殖能力。对照组和白藜芦醇组的MTHFR表达水平分别为1.00±0.08,1.78±0.09;TGF-β1蛋白表达水平分别为1.03±0.06,0.44±0.05;p-Smad3蛋白表达水平分别为0.96±0.06,0.43±0.06,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 白藜芦醇可通过调控MTHFR的表达影响MEPM细胞增殖和周期进程,其调控机制可能与TGFβ1/SMAD3信号通路有关。 
关键词:

白藜芦醇;转化生长因子-β1(TGF-β1)信号通路;间充质细胞;


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