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范金柱,circPDE4B调控miR-7对骨关节炎中软骨ECM降解和细胞凋亡的影响范金柱,任小宇,从飞,宋涛,郭云山,马强.circPDE4B调控miR-7对骨关节炎中软骨ECM降解和细胞凋亡的影响[J].实用骨科杂志,2022,28(06):512-517.DOI:10.13795/j.cnki.sgkz.2022.06.018. circPDE4B调控miR-7对骨关节炎中软骨ECM降解和细胞凋亡的影响范金柱1任小宇1从飞1宋涛1郭云山2马强31. 西安交通大学附属红会医院骨显微修复外科2. 西安交通大学附属红会医院脊柱外科3. 西安交通大学附属红会医院足踝外科摘要：目的 探讨circPDE4B调控miR-7对骨关节炎（osteoarthritis, OA）中软骨细胞外基质（extracellular matrix, ECM）降解和凋亡的影响及机制。方法 采用实时荧光定量聚合酶链式反应（real time-quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR）检测circPDE4B和miR-7在OA软骨组织和软骨细胞中的表达水平。在OA软骨细胞中分别转染oe-NC和oe-circPDE4B,或者转染si-NC、si-circPDE4B和共转染si-circPDE4B+miR-7 inhibitors后，RT-qPCR和免疫蛋白印迹（western blot, WB）检测ECM相关分子SOX9、COL2A1、基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase, MMP）3和MMP13的表达水平；流式细胞术检测细胞凋亡情况。采用双荧光素酶报告基因检测circPDE4B和miR-7的结合情况。结果 circPDE4B的表达水平在OA软骨组织和软骨细胞中明显低于正常软骨组织和软骨细胞（P<0.05）。过表达circPDE4B能够明显抑制OA软骨细胞的凋亡和凋亡相关分子Cleaved-caspase-3蛋白的表达水平（P<0.05）。同时，过表达circPDE4B能够明显促进SOX9和COL2A1的表达水平（P<0.05）,抑制MMP3和MMP13的表达水平（P<0.05）。荧光素酶报告基因检测结果显示circPDE4B能够靶向结合miR-7（P<0.05）,过表达circPDE4B能够抑制miR-7的表达（P<0.05）。circPDE4B和miR-7在OA患者软骨组织中的表达水平呈负相关（P<0.05）。共转染si-circPDE4B和miR-7 inhibitors能够反转单独转染si-circPDE4B对OA软骨细胞凋亡和软骨ECM降解的促进作用（P>0.05）。结论 circPDE4B在OA软骨组织和软骨细胞中明显低表达，circPDE4B能够通过靶向结合miR-7抑制OA软骨细胞凋亡和软骨ECM降解。 关键词： 骨关节炎;circPDE4B;miR-7;细胞外基质;凋亡; |
