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王灵,切向流过滤结合超速离心分离小细胞外囊泡方法的建立王灵,李梦诗,徐莎,陈国栋,王越.切向流过滤结合超速离心分离小细胞外囊泡方法的建立[J].中国生物制品学杂志,2022,35(09):1096-1101.DOI:10.13200/j.cnki.cjb.003713. 切向流过滤结合超速离心分离小细胞外囊泡方法的建立王灵1李梦诗1徐莎1陈国栋1王越2,31. 海军军医大学转化医学研究中心干细胞与再生医学研究室 2. 海军军医大学转化医学研究中心 3. 上海市细胞工程重点实验室摘要：目的 建立切向流过滤结合超速离心分离小细胞外囊泡的方法，以期提升小细胞外囊泡的分离效率。方法使用切向流过滤结合超速离心的方法分离小细胞外囊泡，并通过透射电镜观察、纳米颗粒追踪、Western blot等技术对分离的囊泡进行鉴定。结果 通过该方法分离的小细胞外囊泡直径主要分布在30～250 nm之间，透射电镜下可明确观察到囊泡样结构，纯化后的细胞外囊泡CD9、CD63和ALIX蛋白呈阳性表达，分离时间较常规超速离心方法明显缩短。结论 切向流过滤结合超速离心能够有效分离小细胞外囊泡，提升分离效率。 关键词： 小细胞外囊泡; 切向流过滤; 超速离心; 提取; 基金资助： 国家重点研发计划（2018YFA0108301）； |
