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顾婷立,LncRNA MALAT1调节miR-383-5p/SOCS3轴对人牙周膜干细胞的影响顾婷立,刘亚华,钱靓,章茜.LncRNA MALAT1调节miR-383-5p/SOCS3轴对人牙周膜干细胞的影响[J].口腔医学,2022,42(11):966-973.DOI:10.13591/j.cnki.kqyx.2022.11.002. LncRNA MALAT1调节miR-383-5p/SOCS3轴对人牙周膜干细胞的影响顾婷立刘亚华钱靓章茜南京大学医学院附属口腔医院颌面外科摘要:目的 探究长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)肺腺癌转移相关转录本1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1)调控微小RNA-383-5p(microRNA-383-5p, miR-383-5p)/细胞因子信号转导负调控因子3(suppressor of cytokine signaling 3,SOCS3)轴对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)刺激的人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells, hPDLSCs)增殖、凋亡及成骨分化的影响。方法 LPS处理hPDLSCs后用靶向MALAT1的小干扰RNA(small interfering RNA-MALAT1,si-MALAT1)或miR-383-5p抑制物(miR-383-5p inhibitor, in-miR-383-5p)或SOCS3过表达质粒(SOCS3)转染,ELISA检测炎症因子水平;RT-qPCR和Western blot检测转染效率;CCK-8和TUNEL检测细胞增殖、凋亡;使用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)染色和茜素红S(alizarin red S,ARS)染色分析成骨分化;Western blot对增殖、凋亡以及成骨分化相关蛋白进行检测。生物信息学与双荧光素酶实验分析miR-383-5p与MALAT1/SOCS3之间的关系。结果 LPS可诱导hPDLSCs细胞炎症和凋亡,降低了细胞增殖能力和成骨分化程度;同时上调MALAT1和SOCS3表达,下调miR-383-5p表达(P<0.05)。敲低MALAT1可明显降低LPS诱导的hPDLSCs细胞炎症反应、凋亡能力,细胞增殖能力和成骨分化程度增加;同时还可上调miR-383-5p表达,下调SOCS3表达(P<0.05)。此外,回复实验表明,抑制miR-383-5p表达或上调SOCS3表达可部分逆转MALAT1敲低后对LPS诱导的hPDLSCs细胞的影响(P<0.05)。进一步分析验证,MALAT1海绵化miR-383-5p靶向调控SOCS3表达(P<0.05)。结论 敲低MALAT1可通过调节miR-383-5p/SOCS3轴改善炎症状态下hPDLSCs的增殖、凋亡和成骨分化。 关键词: 长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1;微小RNA-383-5p;细胞因子信号转导负调控因子3;人牙周膜干细胞; 基金资助: 国家自然科学基金(82103516); |