宿伟鹏,赵化荣,李晨曦等.hsa＿circ＿0002141对口腔癌细胞生物学行为的调控作用[J].中华实用诊断与治疗杂志,2023,37(01):28-32.DOI:10.13507/j.issn.1674-3474.2023.01.006.

摘要：目的 筛选人口腔癌细胞系显著差异表达circRNA,探讨hsa＿circ＿0002141对人口腔癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡及对口腔癌裸鼠肿瘤生长的影响。方法 取人口腔癌细胞系HSC3、Sa3、SAS及人正常口腔角质形成细胞系HNOKs,采用高通量测序法检测circRNA表达，筛选显著差异表达的circRNA,取表达上调倍数最高的hsa＿circ＿0002141和高表达hsa＿circ＿0002141的SAS细胞进行后续实验。取SAS细胞分为对照组(正常培养)、空白转染组(转染sh-circNC慢病毒)、转染组(转染sh-circ＿0002141慢病毒),转染2周，采用实时荧光定量PCR法检测3组细胞hsa＿circ＿0002141相对表达量，采用CCK-8法检测细胞增殖，采用Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭，采用流式细胞术测定细胞凋亡率。将6只裸鼠随机分为空白转染模型组和转染模型组各3只，分别接种转染sh-circNC慢病毒、sh-circ＿0002141慢病毒的SAS细胞，于建模第3、6、9、12、15、18、21天测量肿瘤长径和短径，计算肿瘤体积；饲养21 d处死2组裸鼠，测定肿瘤组织质量。结果 HSC3、Sa3、SAS细胞与HNOKs细胞比较共发现152个显著差异表达circRNA,其中9个表达上调，143个表达下调，hsa＿circ＿0002141表达上调倍数最高。转染2周，转染组SAS细胞hsa＿circ＿0002141相对表达量(0.32±0.03)低于对照组(1.00±0.03)和空白转染组(1.02±0.07)(P<0.05)。转染后培养24、48、72、96 h,转染组细胞增殖率[(87.24±8.49)%、(106.33±9.82)%、(130.29±13.06)%、(148.52±14.61)%]均低于对照组[(100.00±9.52)%、(136.17±13.23)%、(170.54±15.92)%、(190.75±18.99)%]和空白转染组[(100.29±9.56)%、(138.58±12.78)%、(171.48±16.51)%、(189.76±18.34)%](P<0.05)。转染后培养24 h,转染组迁移细胞数[(120.05±11.54)个]、侵袭细胞数[(93.95±8.43)个]均少于对照组[(249.80±21.73)、(180.54±16.79)个]和空白转染组[(246.73±23.16)、(176.89±15.81)个](P<0.05)。转染2周，转染组细胞凋亡率[(22.68±2.15)%]高于对照组[(5.30±0.51)%]和空白转染组[(5.26±0.51)%](P<0.05)。对照组细胞hsa＿circ＿0002141相对表达量及不同时间点细胞增殖率、迁移细胞数、侵袭细胞数、细胞凋亡率与空白转染组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。转染模型组裸鼠建模第3、6、9、12、15、18、21天肿瘤体积均大于空白转染模型组(P<0.05),建模第21天肿瘤组织质量[(0.42±0.03)g]低于空白转染模型组[(1.58±0.12)g](t=12.816,P=0.001)。结论 hsa＿circ＿0002141在人口腔癌细胞中呈高表达，下调其表达可抑制SAS细胞增殖，减少SAS细胞、迁移及侵袭，缩小口腔癌裸鼠肿瘤体积，hsa＿circRNA＿0002141可能成为口腔癌治疗的新靶点。