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弗元生物-专业的干细胞培养基 >> 资料 >>技术资料 >> 一手数据：人脂肪间充质干细胞成脂诱导示例（高清大图）

资料

详细内容

一手数据：人脂肪间充质干细胞成脂诱导示例（高清大图）

成脂诱导基本信息

细胞：人脂肪间充质干细胞

细胞培养基系统：人间充质干细胞无血清培养基，货号：RC200101

诱导培养基：人间充质干细胞成脂诱导试剂盒，货号：FY200007

诱导方法：同试剂盒说明书

诱导培养器皿：TC表面六孔细胞培养板

诱导周期：7天

染色方法：油红O红染色

物镜拍照倍数：10X，20X，40X（高清图展示）具体放大见图片标尺。

效果展示

待诱导的细胞状态：

Day3

诱导过程

Day1

Day3

Day5

Day6

Day7

油红O染色

讨论

人脂肪间充质干细胞诱导前形态和表面标志符合间充质干细胞特性；脂肪间充质干细胞培养使用化学成分明确的培养基，传代比例控制在1:4-1:6，传代间隔时间为3-4天。

成脂诱导，按照说明书进行

第1天，细胞形态发生变化，立体感降低，部分发生扁平，由梭形向短粗状转变。

第3天，细胞进一步往上皮样转化，细胞内颗粒度明显增多，细小的颗粒物围绕在细胞核周围，整体观察细胞呈眼睛状，一个个较暗的环围绕相对亮度高的细胞核。

第5天，细胞与诱导3天时比较整体形态变化不大，胞浆与胞核明显的明暗对比度消失。胞浆内明显可见明亮的泡状结构，泡状结构周围有明显的暗带，该种泡状结构即为脂滴。脂滴出现的早期大小有明显差异，随着时间的延长会逐渐变为较大的脂滴。

第6天，鉴于第5天已经可见大量脂滴结构，从此时开始使用维持培养基，直至诱导结束。当脂滴较大后细胞容易脱落，所以要在脱落前终止诱导并进行鉴定染色。为了分辨该结构是否为脂类，我们可以在出现结构后进行荧光活体染色，绿色着色为脂类，蓝色为细胞核，该染色不影响细胞继续诱导培养。染色结果可见，蓝色细胞核清晰可见，泡状结构呈现明显的绿色，泡状结构为脂类。

第7天，细胞继续培养1天，终止诱导，多聚甲醛固定后进行油红O染色。几乎所有细胞内均可见亮红色脂滴，诱导成功。

建议

荧光染色后可继续培养，但过程中应注意避免污染。

油红O染色时注意染色液的使用方式，避免因染色方法失误导致的无着色，该种着色失败无法将染液洗脱后再进行正确的染色，所以切记在最后时刻严格按照操作说明进行。

希望能对操作人员有所帮助，能解决实际问题，满足实际需求。

有相关技术问题，请联系弗元生物。

弗元生物出品，转载务必联系！

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