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弗元生物-专业的干细胞培养基 >> 资 料 >>技术资料 >> 间充质干细胞成脂诱导示例-(高清大图)髌骨下脂肪垫间充质干细胞
详细内容

间充质干细胞成脂诱导示例-(高清大图)髌骨下脂肪垫间充质干细胞

01

成脂诱导基本信息

细胞:人髌骨下脂肪垫间充质干细胞
Infrapatellar fat pad-derived mesenchymal stem cells,IPFP-MSCs
细胞代次:P8
细胞培养基系统:人间充质干细胞培养基,货号:FY200012
诱导培养基:人间充质干细胞成脂诱导试剂盒,货号:FY200007
诱导方法:同试剂盒说明书
诱导培养器皿:TC表面六孔细胞培养板(卧宏)
诱导周期:6天
染色方法:油红O红染色
物镜拍照倍数:4X,10X,20X,40X(高清图展示)具体放大见图片标尺。


02

效果展示


诱导过程
Day0
诱导开始,细胞形态较好,密度合适。

Day1
细胞形态发生微小变化,继续诱导。



Day2
细胞形态发生较为明显的变化,从纤维状转化为近似上皮样。



Day3
细胞发生扁平化,胞浆内颗粒度明显增加。


Day4

开始形成较大脂滴,但形成较大脂滴的细胞数量还较少。



Day5
形成较大脂滴的细胞数明显增多。



Day6
已经有较多的细胞形成了较大脂滴。若继续培养,仍然有更多细胞可以形成大脂滴,假期来临,终止了实验。



Day6
油红O染色
油红O染色后脂滴着色明显,除了较大的脂滴的细胞外,大部分细胞内能看到细小的红色脂滴。


03

讨论
人髌骨下脂肪垫间充质干细胞诱导前形态和表面标志符合间充质干细胞特性;人髌骨下脂肪垫间充质干细胞培养使用经过优化的间充质干细胞培养基,传代比例控制在1:4-1:6,传代间隔时间为3-4天。

建议
油红O染色时注意染色液的使用方式,避免因染色方法失误导致的无着色,该种着色失败无法将染液洗脱后再进行正确的染色,所以切记在最后时刻严格按照操作说明进行。
此次诱导中,细胞成脂的时间并不完全相同,我们采用了脂滴出现的时间进行了终止诱导,获得较好的染色照片。但脂滴尚不够大,有较多的细胞能看到明显的细小脂滴。若继续培养,可以形成较多、较大的脂滴

不同供者、不同代次、不同培养基、不同操作人员在诱导过程中会出现一些时间上和比例上的差异,但总体讲细胞诱导成功时的状态应该基本一致。


希望能对操作人员有所帮助,能解决实际问题,满足实际需求。

有相关技术问题,请联系弗元生物。

弗元生物出品,转载务必联系!


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