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弗元生物-专业的干细胞培养基 >> 资 料 >>技术资料 >> 骨髓间充质干细胞成脂诱导示例(高清大图)
详细内容

骨髓间充质干细胞成脂诱导示例(高清大图)

01

成脂诱导基本信息

细胞:人骨髓间充质干细胞
细胞代次:P6
细胞培养基系统:人间充质干细胞无血清培养基,货号:RC200101
诱导培养基:人间充质干细胞成脂诱导试剂盒,货号:FY200007
诱导方法:同试剂盒说明书
诱导培养器皿:TC表面六孔细胞培养板
诱导周期:10天
染色方法:油红O红染色
物镜拍照倍数:10X,20X,40X(高清图展示)具体放大见图片标尺。


02

效果展示


诱导过程
Day1


Day2

Day3


Day4


Day5


Day8


Day10


Day10
油红O染色


03

讨论
人骨髓间充质干细胞诱导前形态和表面标志符合间充质干细胞特性;人骨髓间充质干细胞培养使用化学成分明确的培养基,传代比例控制在1:4-1:6,传代间隔时间为3-4天。
成脂诱导,按照说明书进行
第3天,部分细胞中开始能看到脂滴出现
第4天,许多细胞中可见明显的颗粒状遮光,部分细胞内颗粒聚合成较为明显的脂滴
第5天,部分细胞可见到较大的脂滴,较亮的球状结构,周围有明显的光晕,10倍物镜下整个细胞成明亮状态,20倍物镜下能看到明显结构
第8天,一些细胞中出现较大的脂滴,很多细胞中脂滴依然较小。已经能证明细胞具有成脂的能力,此时可以进行终止。为了得到更大比例细胞中具有明显的大脂滴,决定继续培养。
第10天,较多的细胞中已经形成较大较明显的脂滴,终止诱导,固定细胞,诱导成功
建议
油红O染色时注意染色液的使用方式,避免因染色方法失误导致的无着色,该种着色失败无法将染液洗脱后再进行正确的染色,所以切记在最后时刻严格按照操作说明进行。
与人脂肪间充质干细胞比较,出现明显脂滴的时间稍晚。(可以参照“脂肪间充质干细胞成脂诱导示例”)此次诱导中,细胞成脂的时间并不完全相同,我们采用了较多脂滴出现的时间进行了终止诱导,可以获得较好的染色照片。若继续培养,已经形成较大脂的细胞可能出现脱壁情况。

不同供者、不同代次、不同培养基、不同操作人员在诱导过程中会出现一些时间上和比例上的差异,但总体讲细胞诱导成功时的状态应该基本一致。


希望能对操作人员有所帮助,能解决实际问题,满足实际需求。

有相关技术问题,请联系弗元生物。

弗元生物出品,转载务必联系!


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