|
间充质干细胞培养避坑指南:轻松绕过那些让人哭笑不得的巨坑(一)各位MSC(间充质干细胞)研究的小伙伴们,是不是经常觉得在培养这些家伙的过程中,总是会遇到一些让人摸不着头脑的问题?从今天开始,弗元生物就给大家带来一份超实战的避坑指南,让我们一起轻松绕过那些让人哭笑不得的陷阱吧! 01 首先得说说这培养瓶、培养板、培养皿的事儿。虽然大家都标榜自己是TC处理的,但实际效果嘛,那真是千差万别。有的品牌,细胞愣是就是不贴壁,MSC们就像是在玩滑滑梯,最后只能是全军覆没。还有的朋友碰到,同一包装里的瓶子,居然只有一个瓶子能有细胞贴壁,其他的细胞全部漂去,这真是完全不按套路出牌。 更诡异的是,有时候明明同一个瓶子、同一个皿、同一个板子,甚至同一个孔的不同位置,细胞的贴壁情况都能差别大到离谱。这些坑,真是让人防不胜防啊! 当然,更多的情况是贴壁,但细胞容易聚团生长,看到的结果就是从4倍镜下看有一些圈状的没有细胞的区域。 所以啊,大家在选择培养器皿的时候,可得擦亮眼睛,同时间多试试不同的品牌,找到最适合你家MSC的“小窝”。如果需要推荐,也可以直接找我。 02 说到接种细胞,许多小伙伴为了追求均匀,简直是使出了浑身解数,各种摇晃、吹打,恨不得把每一个细胞都精准地放到位。但是呢,细胞们其实也是“长了腿”的,它们在生长过程中会自助性到处跑。所以,即使接种的时候稍微有些不均匀,也没关系,后面它们自己会调整过来。 相反,如果太过暴力地吹打,反而会伤了MSC们,导致它们不贴壁甚至死亡。所以,接种的时候还是要温柔一些,别让这些小家伙们一开始就受到惊吓。 当然,不均匀也可能是培养箱震动导致的,这个很容易被忽略。别跟离心机放太近,别放到不稳定的桌子上,问题基本就解决啦。 03 消化细胞也是个有意思的活儿。质量好的MSC,在足量复温胰酶、温度合适的情况下,2分钟左右就能搞定。但如果5分钟了还不行,那就得找找其他原因了,可能是消化酶有问题,也可能是细胞状态不佳,或者是胰酶的量不够。这时候继续加长时间是没意义的,更不能因为没消化下来就使劲吹打。 记住哦,吹打的损伤可是比胰酶消化过度还要严重的。所以啊,宁肯多等一分钟,也不能暴力吹打。如果实在消化不下来,可以试试用手轻轻拍打、拨动,或者涡旋振荡,总之要温柔对待这些家伙们。 04 在这个知识爆炸的时代,各种新的研究成果和方法层出不穷。前辈们的经验虽然宝贵,但也要结合具体情况来看。比如传统认知MSC只能养六七代,但在新的培养条件下,UMSC养超过20代都是稀松平常的事儿了。其他组织来源的MSC养过10代都算是基本要求了。 所以,我们要遵循第一性原理,筛选出最有用的方案。不盲目跟风,也不被传统观念束缚。就像以前我们认为的成纤维细胞,但现在我们用MSC培养基去养它们,发现它们和MSC定义中的特性居然是一样的,那么它们到底该叫什么细胞呢,有朋友打趣说“成纤维细胞已然老去”、“成纤维细胞已死”。那么,为什么我们不能探索更科学的新大陆呢? 好啦,今天的避坑指南就到这里啦!希望这些小贴士能帮到正在受这些问题困扰的小伙伴们。记住哦,科研之路虽然充满挑战,但只要我们保持好奇心和耐心,就一定能找到属于自己的那片天空!加油哦! 持续关注,后边弗元生物会继续整理实战经验,带大家继续避坑。 05 有需要上文提到的参考文件的朋友,可以展开阅读: |