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新手必读:显微镜拍照时标尺的使用及原理

对于刚开始接触显微镜的朋友来说,显微镜标尺是一个既熟悉又陌生的存在。熟悉是因为经常能在显微镜观察的画面或者拍出的照片里看到它,陌生则是很多人并不清楚它到底该怎么用,有什么注意事项,以及背后的原理。下面先讲实际操作,后再讲一些拓展的知识。

 

01

实用操作及注意事项

(一)怎么用

  • 开启标尺显示:如果你使用的是带有电子拍照系统的显微镜,首先要在系统设置中找到标尺显示的选项并开启。不同品牌和型号的显微镜操作方式有所不同,但一般都能在图像采集软件的设置菜单里找到。

  • 调整标尺单位和长度:根据你观察的样本大小和实际需求,选择合适的标尺单位(如微米、纳米等)和长度。比如观察细胞时,通常选择微米作为单位,长度可以根据细胞的大致尺寸来确定,一般 10 - 100 微米较为常见。

  • 注意标尺的选择:标尺是与使用的显微镜倍数相对应的,拍照前要确保标尺和物镜的对应关系,避免用混。

  • 添加标尺到照片:在完成观察并准备拍照时,确保标尺已经正确显示在画面中,然后进行拍照操作,这样标尺就会和样本图像一起被记录下来。不同系统标尺的记录也可能有差异,拍照后记得要确认一下标尺是否有记录。

(二)注意事项

  • 颜色选择:标尺及字体的颜色是可以选择的。标尺颜色一般要与样本颜色形成鲜明对比,以保证清晰可辨。例如,观察的样本是红色的细胞,那么标尺可以选择黄色、绿色、白色等颜色(成骨诱导后染色呈红色,所以标尺避免使用红色)。

  • 粗细设置:标尺不能过粗或过细。过粗会遮挡样本细节,过细则在照片中难以看清。一般适中的粗细,在保证清晰的同时又不会干扰对样本的观察。

  • 位置摆放:标尺应放置在不妨碍观察样本主要结构的位置,通常放在画面的边缘部分,如底部或右侧。同时,要确保标尺与样本在同一平面上,避免因位置偏差导致测量误差。



02

标尺的作用

显微镜标尺最主要的作用就是测量。通过标尺,我们可以准确得知样本中物体的大小、长度、宽度等尺寸信息。这对于科研工作者来说至关重要,比如在细胞生物学研究中,通过测量细胞的大小和形态变化,可以了解细胞的生长状态、病变情况等。

要记得,一般情况下发表的文章中细胞照片都是要有标尺的!

 

03

技术发展

在早期没有电子拍照系统的时候,显微镜的标尺是实实在在安装在显微镜上的。那时候的标尺一般是刻在目镜或者物镜上的刻度线,观察时直接通过目镜就能看到标尺和样本叠加的画面,以此来进行大致的测量。

随着技术的发展,电子拍照系统被应用到显微镜上,标尺的显示方式也发生了变化。现在我们可以通过软件在拍摄的照片上添加虚拟标尺,并且可以根据需要灵活调整标尺的各种参数,测量变得更加精确和便捷。

也就是说,现在使用电子系统拍照的朋友不用担心显微镜没有装标尺,实际上现在的显微镜一般都已经不安装标尺,标尺都在软件上,直接拿来用就好啦!

 

04

现在电子拍照系统中标尺的原理

电子拍照系统中的标尺是通过软件算法实现的。在使用前,需要用实物标尺(如标准的微米尺)进行标定。标定过程就是让显微镜拍摄实物标尺,软件根据实物标尺的实际尺寸和在照片中所占的像素数量,计算出每个像素代表的实际长度。这样在后续拍摄样本时,软件就能根据这个比例关系,在照片上添加准确的标尺,实现对样本尺寸的测量。

需要注意的是,新安装的电子拍照系统一定要进行标尺的标定,没有标定过的自带标尺是不准确的,或者不标定就没有可用的标尺!反过来说就是,没有可用的标尺可能是还没有进行标定!

掌握显微镜标尺的使用,能让我们在显微镜观察和研究中获得更准确的信息。希望这篇文章能帮助大家更好地理解和运用显微镜标尺。

 


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