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弗元生物 >> 资 料 >>技术资料 >> 一手数据:hiPS人诱导多能干细胞生长状态和增殖速度(高清图片)
详细内容

一手数据:hiPS人诱导多能干细胞生长状态和增殖速度(高清图片)


01

诱导多能干细胞培养基本信息
细胞:人诱导多能干细胞(hiPSCs)
细胞培养基系统:FyPluri(TM) hESCs/hiPSCs人多能干细胞全合成培养基,货号:RC200120
细胞代次:P7(FyPluri连续培养
传代方式:Accutase消化
传代比例:1:20
培养器皿:TC表面六孔细胞培养板(WHB-6)
表面处理:基质胶包被
培养间隔时间:4天
物镜拍照倍数:4X、10X(高清图展示)
培养程序:
RC200120 流程图(竖版).jpg

02

增殖过程展示
Day 1
iPS-P7-1D-4.jpg
iPS-P7-1D-10.jpg


Day 2
iPS-P7-2D-4.jpg
iPS-P7-2D-10.jpg

Day 3
iPS-P7-3D-4.jpg
iPS-P7-3D-10.jpg

Day 4
iPS-P7-4D-4.jpg
iPS-P7-4D-10.jpg
注:以上照片在换液前拍摄。
ES细胞相关内容:
hESCs人胚胎干细胞生长状态和增殖速度(高清图片)

03

本文细胞传代方式为单细胞传代

48小时细胞形成明显的克隆,且克隆与24小时比较有明显的增大。每24小时的观察期间克隆都能明显见到增大。

每24小时更换新鲜培养基,否则可能导致细胞分化或死亡增多。在实际操作中不管是因为代谢物增多,还是因为营养成分被消耗,总之不更换新鲜培养基会导致细胞状态变差,培养不容易持续。所以,不建议进行不换液的挑战。

传代时间按照单个克隆的直径大小。单个克隆直径超过500μm后,克隆中间细胞容易出现拥挤、叠层、脱落等情况,细胞容易出现分化或干性下降或传代后较多细胞死亡。所以,建议克隆直径不超过500μm进行传代,时间上一般在4天左右。

若细胞克隆直径已经够大,克隆间尚有较多的空间,需要进行传代。如上图第四天的状态,细胞确实没有长满。但若继续培养一天细胞则可能过于拥挤,从而导致传代后细胞状态变差。所以若处于此状态,可以立即传代或等待半天进行传代,尽量不要过一天再传代。


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