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一手数据：hiPS人诱导多能干细胞生长状态和增殖速度（高清图片）


01

人诱导多能干细胞培养基本信息
细胞：人诱导多能干细胞（hiPSCs）
细胞培养基系统：FyPluri(TM) hESCs/hiPSCs人多能干细胞全合成培养基，货号：RC200120
细胞代次：P7（FyPluri连续培养）
传代方式：Accutase消化
传代比例：1：20
培养器皿：TC表面六孔细胞培养板（WHB-6）
表面处理：基质胶包被
培养间隔时间：4天
物镜拍照倍数：4X、10X（高清图展示）
培养程序：
RC200120 流程图（竖版）.jpg

02

增殖过程展示
Day 1
iPS-P7-1D-4.jpg
iPS-P7-1D-10.jpg


Day 2
iPS-P7-2D-4.jpg
iPS-P7-2D-10.jpg

Day 3
iPS-P7-3D-4.jpg
iPS-P7-3D-10.jpg

Day 4
iPS-P7-4D-4.jpg
iPS-P7-4D-10.jpg
注：以上照片在换液前拍摄。
ES细胞相关内容：
hESCs人胚胎干细胞生长状态和增殖速度（高清图片）

03

注
本文细胞传代方式为单细胞传代。

48小时细胞形成明显的克隆，且克隆与24小时比较有明显的增大。每24小时的观察期间克隆都能明显见到增大。

每24小时更换新鲜培养基，否则可能导致细胞分化或死亡增多。在实际操作中不管是因为代谢物增多，还是因为营养成分被消耗，总之不更换新鲜培养基会导致细胞状态变差，培养不容易持续。所以，不建议进行不换液的挑战。

传代时间按照单个克隆的直径大小。单个克隆直径超过500μm后，克隆中间细胞容易出现拥挤、叠层、脱落等情况，细胞容易出现分化或干性下降或传代后较多细胞死亡。所以，建议克隆直径不超过500μm进行传代，时间上一般在4天左右。

若细胞克隆直径已经够大，克隆间尚有较多的空间，需要进行传代。如上图第四天的状态，细胞确实没有长满。但若继续培养一天细胞则可能过于拥挤，从而导致传代后细胞状态变差。所以若处于此状态，可以立即传代或等待半天进行传代，尽量不要过一天再传代。


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