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细胞凋亡(apoptosis)是细胞生物学研究的重要指标,分为早期凋亡、中期凋亡和晚期凋亡。凋亡的不同阶段使用的检测鉴定方法各异,在实际研究中往往忽略凋亡检测手段的具体意义,可能导致结果不能支撑论点。细胞凋亡的早期,细胞膜结构发生变化,此时使用FACS分析细胞膜(Annexin V-FITC染色)是较为理想的方法,同时使用PI去除死细胞的干扰。细胞凋亡中期,DNA断裂,TUNEL染色法的染料可以特异结合到断裂的DNA位点,使用化学显色、荧光或FACS方法均可多信号进行检测。凋亡晚期,DNA完全断裂,普遍认为DNA ladder是凋亡的金指标。凋亡检测还可使用WB、qPCR等方法检测caspase3等凋亡通路相关基因的表达。
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