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弗元生物-再生医学培养基 >> 资 料 >>技术资料 >> 脐带间充质干细胞成骨诱导示例(高清大图)
详细内容

脐带间充质干细胞成骨诱导示例(高清大图)


01

成骨诱导基本信息



细胞:人脐带间充质干细胞
细胞培养基系统:人脐带间充质干细胞无血清培养基(化学成分明确),货号:RC200136
细胞代次:P16
诱导培养基:人间充质干细胞成骨诱导试剂盒,货号:FY200006
诱导方法:同试剂盒说明书
诱导培养器皿:TC表面六孔细胞培养板
诱导周期:13天
染色方法:茜素红染色
物镜拍照倍数:4X,10X(高清图展示)

02

效果展示
待诱导的细胞状态(P16):
Day3


p16_3d.jpg

p16_3d_.jpg




Day4




诱导过程
Day3





Day6




Day9





Day13




茜素红染色






03

讨论
人脐带间充质干细胞诱导前,尽管已经长到P16,但从图片上看细胞形态状态良好;从3天到4天的增殖情况看,细胞增殖速度大概1天扩增约1倍;基于这些观察,我们决定尝试进行成骨诱导检测。
成骨诱导开始后,
第3天,细胞增殖到较为密集的程度,部分区域出现叠层,细胞仍然呈现为成纤维细胞样,已经可见沙粒状沉淀。
第6天,细胞形态变得模糊,沙粒状沉淀遍布视野。沉淀越多的区域,细胞形态越不清晰;沉淀较少的地方,仍然可见呈现成纤维细胞样的细胞形态。
第9天,细胞形态模糊,沉淀在局部呈现大量堆积,严重遮光。实际上,此时已经可以进行茜素红染色。
第13天,细胞形态几乎无法辨识,沉淀持续大量堆积,局部区域形成不透光结节。终止诱导,进行茜素红染色。
染色结果显示,整个视野呈现红色,部分区域因为严重遮光而显得较暗。
建议
这里只讲一条。若计划进行碱性磷酸酶染色,建议在诱导的较早阶段开始进行,可连续几天进行染色。当大量沙粒状沉淀出现后,细胞形态开始模糊,再进行碱性磷酸酶染色可能会对呈现的照片效果有所影响。

希望能对操作人员有所帮助,能解决实际问题,满足实际需求。
弗元生物再生医学培养基详情请点击参考。
成骨诱导注意事项请点击参考。

有相关技术问题,请联系弗元生物。

弗元生物出品,转载务必联系!




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